RNAscope ISH 手动分析
手动 RNAscope ISH 分析使用一种新型、专有的显色原位杂交 (ISH) 方法，在单个细胞水平上可视化单个 RNA 分子，从空间上对其进行检测，同时维持空间组织微环境。RNAscope ISH 手动分析包括 3 款显色分析和 3 款荧光分析。
RNAscope 2.5 HD 分析 - 棕色
RNAscope 2.5 HD 分析 - 棕色
高度灵敏的 RNA ISH 方法，用于检测低表达基因靶标。
稳定、可靠的检测，非常适合首次操作的用户。
可对低拷贝靶标（每个细胞中含 1-20 个拷贝）进行强烈的 DAB 染色。
使用标准明场显微镜即可观察。
RNAscope 2.5 HD 双重分析
RNAscope 2.5 HD 双重分析
能够在单细胞分辨率下同时检测两个 RNA 靶标。
使用基于 HRP 的绿色色原和基于 AP 的 Fast RED 色原。
永久染色，非常适合归档样本，使用明场显微镜即可观察。
显色 RNAscope ISH 技术分析表格：
查看下表，详细了解哪款手动显色 RNA ISH 产品可满足您的研究需求。
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RNAscope 2.5 HD 分析 - 棕色 |
RNAscope 2.5 HD 分析 - 红色 |
RNAscope 2.5 HD 双重分析 |
RNAscope 多重荧光分析 提供两款试剂盒 - 详情请参见此处 |
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分析类型 |
显色 |
显色 |
显色 |
荧光 |
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所用染料 |
二氨基联苯胺 (DAB) |
Fast Red |
HRP 绿色和 Fast Red |
基于酪酰胺信号放大 (TSA) 的 Opal 荧光团 |
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RNAscope 探针指定通道 |
通道 1 |
通道 1 |
通道 1 和 2 |
通道 1-4 |
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多重分析 |
单重 |
单重 |
单重、双重 |
单重至四重 |
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关键优势 |
稳定、灵敏、永久染色。使用最广泛的 RNAscope 分析 |
染料色彩明亮，与背景对比度高 |
使用 2 种不同的染色酶，因此可避免两种染色剂之间的任何串扰 |
采用 4 个不同的光谱通道，灵活性高 |
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适用范围 |
用户首次操作，常规应用 |
适用于含有内源颜色背景的组织，如色素沉着的皮肤、肝或吸烟者的肺 |
同时研究两种 RNA 生物标志物 |
同时分析最多 4 个基因的共定位研究及要求灵活性的实验 |
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新基因或未知表达 |
兼容 |
兼容 |
兼容 |
兼容 |
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归档样本 |
兼容 |
兼容 |
兼容 |
兼容 |
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显微镜成像系统 |
标准明场 |
标准明场 多光谱荧光成像 |
标准明场 |
多光谱荧光成像 |
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样本类型* |
FFPE 组织 (TMA) |
FFPE 组织 (TMA) |
FFPE 组织 (TMA) |
FFPE 组织 (TMA) |
荧光 RNAscope ISH 分析
RNAscope HiPlex 分析
同时检测多达 12 个不同的 RNA 靶标。
在空间背景下验证单细胞内的基因标记。
快速荧光团切割可确保对 RNA 或组织形态的影响最小/无影响。
使用 RNAscope HiPlex 注册软件合并荧光团图像。
RNAscope 多重荧光 V2 分析
RNAscope 多重荧光 V2 分析
同时检测多达 4 个靶标。
获得专利的 ISH 信号放大技术，将应用扩展到 FFPE 样本和 ISH-IHC 工作流程。
使用序贯分析工作流程以及 Opal 染料和酪酰胺信号放大技术（TSA™，Akoya Biosciences），灵活进行可视化。
荧光 RNAscope ISH 技术分析表格：
查看下表，详细了解哪款手动荧光 RNA 原位杂交产品可满足您的研究需求。
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RNAscope HiPlex |
RNAscope 多重荧光 v2 |
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提供的靶标检测重数 |
配合使用 RNAscope 12 重辅助试剂盒，可实现 12 重检测能力 （目录编号 324140）* |
配合使用适用于多重荧光 v2 的 RNAscope 4 重辅助试剂盒，可实现 4 重检测能力 （目录编号 323120）* |
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适用的样本制备方式 |
新鲜冰冻、固定冰冻 |
FFPE、固定冰冻（低表达子）**细胞和新鲜冰冻 （如果是高度自发荧光的样本） |
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需要的其他产品 |
无 |
Opal 染料必须从 Akoya Biosciences 购买。 |
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工作流程时长 |
9 小时（建议分 3 天进行） |
14 小时（建议分 2 天进行） |
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使用/推荐的荧光团 |
检测试剂盒（荧光试剂）中提供的 Alexa Fluor-488、Atto-550、Atto-647N、Alexa Fluor-750 荧光团 |
购自 Akoya Biosciences： |
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可切割荧光团 |
是 |
否 |
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ISH-IF 兼容性 |
兼容 |
兼容：请参阅编号为 323100-TN 的文档 |
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推荐用于 |
自发荧光较低的组织 |
自发荧光较高的组织 |
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探针指定 |
RNAscope HiPlex 探针：T1、T2、T3、T4、……T12 |
RNAscope 探针：C1、C2、C3、C4 |
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推荐的荧光显微镜滤光片组： |
Ex Max 358 nm/Em Max 461 nm (DAPI) |
Ex Max 358 nm/Em Max 461 nm (DAPI) |
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封片剂 |
Prolong Gold |
Prolong Gold |
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目录编号 |
324100 |
323100 |
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说明 |
RNAscope 荧光多重试剂盒采用 ACD 专有的扩大策略设计而成。该分析使用 Alexa Fluor-488、Atto-550、Atto-647N 和 Alexa Fluor-750，可在同一组织切片上检测多达 12 个靶标。 |
基于 TSA 的荧光 RNAscope 检测分析，使用 Opal 荧光团（单独销售），最多可进行 4 重检测。非常适用于 FFPE 组织 |
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研究领域 |
神经科学 |
免疫肿瘤学（CD8、PD1、PDL1）、肿瘤学、神经科学 |